Методические рекомендации по оценке действия и потенциальной опасности пестицидов для медоносных пчел




Скачать 409.18 Kb.
НазваниеМетодические рекомендации по оценке действия и потенциальной опасности пестицидов для медоносных пчел
страница2/6
Дата публикации08.07.2013
Размер409.18 Kb.
ТипМетодические рекомендации
lit-yaz.ru > Физика > Методические рекомендации
1   2   3   4   5   6
^

II. ЛАБОРАТОРНЫЕ ИСПЫТАНИЯ



Проведение лабораторных испытаний является необходимым и обязательным условием для оценки действия пестицидов на медоносных пчел, определения степени их опасности. Результаты лабораторных испытаний позволяют определить ход дальнейших исследований и с определенной долей вероятности классифицировать испытываемые препараты, обосновать мероприятия по предупреждению возможного отрицательного их воздействия их на полезную энтомофауну.

2.1. Общие требования



2.1.1. Подготовка пчел


Используют предпочтительно молодых взрослых рабочих пчел одинакового возраста. Пчелы должны происходить из здоровой семьи с хорошей пчелиной маткой и с достаточными запасами корма. Пчел собирают с рамок без расплода или с прилетной доски улья. Следует избегать отбора пчел ранней весной или поздней осенью. Пчелы могут быть также выведены в инкубаторе, при условии обеспечения их свежей или хорошо сохранившейся пыльцой/пергой и раствором сахара. Следует указывать использованный метод сбора, возраст, расу пчел (при возможности) и дату проведения эксперимента.

Обездвиживание пчел может быть обеспечено двуокисью углерода. При этом используют минимальное количество СО2 и минимальную экспозицию, обеспечивающие необходимую анестезию насекомых.

2.1.2. Условия проведения испытаний


Пчел помещают в чистый, хорошо вентилируемый садок для содержания. Нельзя использовать пластиковые садки, бывшие в аналогичных испытаниях с другими химическими продуктами, т.к. возможно их химическое загрязнение. Необходимо избегать повторного использования деревянных садков, если только они не очищены особым образом и не стерилизованы. Лучше использовать одноразовые садки, например, картонные со съемной крышкой и двумя сторонами, затянутыми сеткой. Садки не должны быть причиной гибели пчел в контроле. После обработки пчел содержат при температуре 25+20С и относительной влажности 60-70%.

Температура испытываемого вещества должна быть не ниже температуры садка с пчелами.

Обработки проводят производственным продуктом и его действующим веществом. Следует предусмотреть контроли: обработка растворителем (при необходимости), соответствующим рекомендованным референтным продуктом для проверки постоянства результатов (напр. высокотоксичные для пчел паратион, диметоат) и чистый контроль - без обработки пчел.

Доза испытуемого вещества задается 10 пчелам индивидуально или группе, включающей самое меньшее 10 пчел. В опытах по п.п. 2.5. и 2.6.2. количество пчел в садках должно быть не менее 100. Пчелы не должны содержаться поодиночке более 1 часа.

Для каждой концентрации (дозы) испытуемого вещества используют самое меньшее три группы по 10 (или больше, но равное во всех повторностях) пчел.

Используют ряд концентраций, подходящий для того, чтобы вывести линию регрессии и определить ЛД50.

2.2. Определение острой оральной и контактной токсичности


Основным направлением опасного воздействия остро токсичных веществ является их контактное действие. Контактная ЛД50 - наиболее важная величина при оценке инсектицидов, тогда как оральная ЛД50 является наиболее важной величиной для оценки веществ, не являющихся остро токсичными, таких как гербициды, фунгициды.

В лаборатории оценивают оральную и контактную токсичность исследуемого вещества для взрослых рабочих пчел. Их подвергают воздействию различных доз вещества путем скармливания, топикального нанесения или контакта с обработанной поверхностью при групповом воздействии. Величину смертности используют для построения линии регрессии и определения ЛД50.

2.2.1. Определение оральной токсичности


2.2.1.1. Испытуемый(е) продукт(ы)
Используют формуляцию препарата и его действующее вещество, каждое в смеси с 20-50% раствором сахара. Если возможно, смешивают с раствором сахара без использования дополнительных химических растворителей.
2.2.1.2. Способ скармливания
Пчел не кормят в течение 2-х часов перед опытом. При индивидуальном скармливании 10 или 20 мкл опытного раствора для каждой пчелы задают с помощью стеклянной трубки. При групповом скармливании пчелы берут опытный раствор сахара самостоятельно, обмениваются кормом друг с другом и, таким образом, получают усредненные дозы. После опытного кормления пчел обеспечивают чистым раствором сахара и меняют его ежедневно, если опыт продолжается 48 часов.

2.2.2. Определение контактной токсичности


2.2.2.1. Испытуемый(е) продукт(ы)
Если возможно, вещество растворяют в ацетоне. В противном случае используют другие растворители.
2.2.2.2. Способ индивидуального нанесения
Анестезированных пчел обрабатывают путем топикального нанесения испытуемого вещества. Точно отмеренное количество продукта наносят на грудь каждой пчелы. После нанесения дают пчелам свежий раствор сахара и меняют его ежедневно, если опыт продолжается 48 часов. Пчелам контрольной группы наносят на грудь такое же количество растворителя. Обработанных пчел возвращают в садки.
2.2.2.3. Определение острой токсичности при групповом воздействии на пчел проводят по п.2.6.1.

2.2.3. Способ оценки


Подсчитывают число погибших и пораженных (пострадавших) пчел через 24 и 48 часов или больше (если смертность постепенно возрастает).

2.2.4. Результаты


Если смертность в чистом контроле значительна (больше 15%) или гибель от испытуемого средства выше, чем от остро токсичного референтного препарата, необходимо повторить опыт. После коррекции на смертность в контролях подсчитывают смертность и, проанализировав соответствующими статистическими методами, вычисляют величину средней летальной дозы (ЛД50), выражая ее в мкг действующего вещества или препаративной формы на 1 пчелу.

2.3. Определение острого фумигантного действия

(для веществ, обладающих выраженной летучестью при 20оС)
Чистые чашки Петри заполняют наполовину раствором испытуемого препарата в рекомендуемой рабочей концентрации; садки с пчелами устанавливают сверху непосредственно на края чашек так, чтобы испарения испытываемого вещества проникали через перфорированное дно садка внутрь. Экспозиция - 8 часов.

Садок с контрольными пчелами устанавливают над чашкой Петри с растворителем или водой.

Подсчитывают число погибших и пораженных пчел через 24 и 48 часов или больше (если смертность постепенно возрастает), в опытных и контрольных садках.

2.4. Определение репеллентной активности

(для веществ, ЛД50 которых менее 10 мкг/пч)
Исследование репеллентных свойств препаративной формы проводят путем одновременного группового скармливания опытных растворов сахара с различными концентрациями препарата в садках с 5-6 пробирочно-вакуумными кормушками. Это позволяет испытывать одновременно до 5 концентраций препарата в сравнении с чистым контролем (раствор сахара без препарата). О репеллентных свойствах препарата судят по расходу корма в отдельных кормушках за 48 часов и рассчитывают Коэффициент Защитного Действия (КЗД) по формуле:

КЗД = 100 - (О х 100 / К) %



где:

О - количество сахарного сиропа, потребленного пчелами из опытной кормушки;

К - количество сахарного сиропа, потребленного пчелами из контрольной кормушки;
Расчет КЗД делается для каждой испытанной концентрации

2.5. Определение хронической оральной токсичности при групповом скармливании

(если ЛД50 действующего вещества и препаративной формы при остром оральном и контактном действии менее 100 мкг/пчелу, а также для веществ, приводящих к увеличивающейся гибели пчел к 48 часам наблюдения в сравнении с 24 часами)
Используют смесь меда с водой (1:1) или раствор сахара (2:1); в вертикальных кормушках, закрытых пластиковыми пробками с кормовыми отверстиями. Корм содержит 1/2, 1/4 и при возможности меньшие части ранее определенной максимально переносимой концентрации/дозы (ЛД2) действующего вещества и/или препаративной формы. Ежедневно проводят учет гибели пчел до тех пор, пока не погибнет половина или большая часть насекомых; по результатам наблюдений определяют показатель средней продолжительности жизни пчел для каждой концентрации пестицида по формуле:

Пж = (а1 + а2 + а3 + ... аn) / N,
где:

а1, а2, аn - число живых пчел после 1, 2, n дней скармливания опытного корма;

N - число первоначально взятых в опыт пчел;
Контрольные пчелы постоянно получают чистый раствор сахара, который ежедневно меняют на свежеприготовленный.

2.6. Определение контактной токсичности при групповом воздействии.


Показатели острого контактного действия испытуемого вещества могут быть также определены на группе пчел, при этом одновременно можно установить продолжительность токсического действия препаративной формы при контакте с обработанной поверхностью.

2.6.1. Острая контактная токсичность при групповом воздействии.


На матовое стекло, соответствующее размерам дна садка, наносят 1 мл раствора препарата в рекомендуемой рабочей концентрации (или раствор адекватного количества действующего вещества), высушивают на открытом воздухе в естественных условиях. Затем его помещают на дно специального садка (экспозиметра) с пчелами. Обеспечивают принудительное контактирование пчел с поверхностью стекла в течение 30 минут. Затем пчел переносят в чистый садок для дальнейших наблюдений.

2.6.2. Определение продолжительности остаточного действия препарата на стеклянной поверхности.

(для веществ, ЛД50 которых менее 10 мкг/пч)
Использованное в опыте по п.2.6.1. обработанное стекло хранят на открытом воздухе под навесом и периодически используют для принудительного контактирования новых групп пчел. По результатам учета гибели пчел в опыте п.2.6.1. и в последующие дни определяют длительность остаточного действия препарата в сутках. Контрольные пчелы в обоих опытах (п.п. 2.6.1. и 2.6.2.) контактируют со стеклом, обработанным использованным в опыте растворителем или водой.

2.6.3. Ориентировочное определение времени детоксикации пестицида на растениях.


В поле, обработанном испытуемым препаратом, сразу после обработки, затем через 24, 48 и более часов после ее проведения срезают отдельные части растений.

Мелкие фрагменты растений помещают в энтомологические садки с пчелами, определяют продолжительность жизни пчел в садках содержащих растения, определенного срока сбора, ежедневно на протяжение 48-72 часов.

Контрольных пчел содержат в садках, куда помещают необработанные препаратом такие же растения, собранные в те же сроки; учитывают гибель пчел.

2.7. Оценка опасности пестицида в условиях регламентированного применения по результатам лабораторных исследований.



2.7.1. Определение класса токсичности действующего вещества и препаративной формы в лабораторных условиях.


Острая контактная и оральная токсичность (ЛД50) близки по своим величинам. Большие отклонения могут свидетельствовать об ошибочности данных.

Для определения класса токсичности принимают во внимание наименьшую величину ЛД50 острого контактного или орального воздействия.

^ Классы токсичности Величина ЛД50 (мкг/пчелу)



Чрезвычайно высоко токсично
I
< 0,1
Высоко токсично
II
от 0,1
до 1,0
Умеренно токсично
III
от 1.1
до 10
Слабо токсично
IV
от 10.1
до 100
Практически не токсично
V
> 100


Значение ЛД2 является предельно допустимой величиной гибели взрослых пчел вследствие острого отравления, не отражающейся на последующей жизнедеятельности семей. При сравнении этой величины с объемами вносимого действующего вещества (препаративной формы) на 1 га обрабатываемой площади можно дополнительно судить о степени опасности пестицида для пчел. Величину ЛД2 определяют по линии регрессии.

2.7.2. Определение коэффициентов риска (КР) контактного (КРк) и орального (КРо) воздействия и класса опасности пестицида.


Для определения КР берется максимально рекомендуемая гектарная норма препарата в граммах действующего вещества на 1 га и наименьшие величины ЛД50 в мкг /пчелу при контактном и оральном воздействии. При проявлении более высокой токсичности препаративной формы в сравнении с действующим веществом для определения коэффициента риска берут максимально рекомендуемую гектарную норму препарата в граммах на 1 га и наименьшие величины ЛД50 препаративной формы в мкг/пчелу при контактном и оральном воздействии. Пестициды, содержащие смесь действующих веществ, оцениваются по токсичности и норме расхода препаративной формы.

Расчет КР проводят по формуле:

КРк = Максимальная гектарная норма / ЛД50 контактного действия
КРо = Максимальная гектарная норма / ЛД50 орального действия


По наибольшей величине КР определяют класс опасности:

^ Класс опасности Величина К




Высоко опасен

I




> 50

Средне опасен

II




26-50

Мало опасен

III




< 25



2.7.3. Оценка остаточной токсичности препарата в лабораторных условиях.


Остаточную токсичность препарата оценивают по показателям его токсичности при контакте пчел с обработанной стеклянной поверхностью или поверхностью обработанных растений, по длительности проявления фумигантного действия (при его наличии).

По этому показателю пестициды можно разделить на две группы -

  • остаточная токсичность низкая, если 50% пчел погибает в первые 8 часов воздействия препарата и в последующем к окончанию 24 часов гибель снижается - ОТ50 < 8 часов;

  • остаточная токсичность высокая - ОТ50 > 8 часов.


2.7.4. Выраженность репеллентной активности (коэффициент защитного действия - КЗД)


По репеллентной активности можно выделить следующие группы пестицидов:

Группы КЗД


выраженная 25-75

слабая < 25

отсутствует = 0

2.7.5. Показатели оральной хронической токсичности.


Определяют среднюю продолжительность жизни опытной группы пчел (М+м) в сравнении с контролем в сутках для каждой дозы препарата. Достоверность различий в показателях должна быть определена методами вариационной статистики.

На основе анализа могут быть выделены группы пестицидов:

  • обладающие хронической токсичностью

  • не обладающие хронической токсичностью.


2.8. Комплексная оценка действия пестицида по результатам лабораторных испытаний и принятие решения.


По результатам лабораторных испытаний пунктов 2.7.1-2.7.5. могут быть приняты решения:

1. О прекращении дальнейших исследований, при условиях, что испытуемое средство:

  • не используется на стадиях бутонизации и цветения растений; не относится к препаратам системного действия, регуляторам роста насекомых и не представляет опасности для пчел по каким-либо другим соображениям;

  • обладает выраженным репеллентным действием на пчел (КЗД = 25-75) в течение времени сохранения препарата в окружающей среде;

или:

  • имеет сочетанный комплекс лабораторных показателей;

  • величина ЛД50 при контактном и оральном воздействии >100 мкг/пчелу;

  • коэффициент риска < 50;

  • фумигантная токсичность отсутствует

  • остаточная устойчивость - ЛТ50 < 8 часов

или:

  • имеет другие сочетания показателей, когда токсичность препарата гарантированно

  • резко снижается за счет его малой устойчивости, репеллентности, времени применения, обеспечивающие распад пестицида и т.д.; при отсутствии подозрений на другие возможные виды отрицательного воздействия препарата на пчел.


2. Во всех остальных случаях и при возникновении трудностей интерпретации результатов лабораторных исследований необходимы дальнейшие испытания на семьях пчел.


1   2   3   4   5   6

Похожие:

Методические рекомендации по оценке действия и потенциальной опасности пестицидов для медоносных пчел iconМетодические рекомендации по оценке азс для целей залога Москва 2009
Этап № Заключение договора на проведение оценки, включающего задание на оценку. 7

Методические рекомендации по оценке действия и потенциальной опасности пестицидов для медоносных пчел iconРуководство по оценке результатов обучения в населенном пункте перевод...
Методические рекомендации по организации и порядку осуществления программ ипотечного жилищного кредитования

Методические рекомендации по оценке действия и потенциальной опасности пестицидов для медоносных пчел iconМетодические рекомендации по выполнению курсового проекта по дисциплине...
Методические рекомендации для студентов специальности 050501. 65 Профессиональное обучение (дизайн)

Методические рекомендации по оценке действия и потенциальной опасности пестицидов для медоносных пчел iconМетодические рекомендации по изучению дисциплины для студентов предназначены...
Федосеев А. И. Автоматизированные системы управления на автомобильном транспорте: Методические рекомендации по изучению дисциплины...

Методические рекомендации по оценке действия и потенциальной опасности пестицидов для медоносных пчел iconМетодические рекомендации Казань 2010 г
Методические рекомендации предназначены для врачей Роспотребнадзора, профпатологов, специалистов медико-санитарных частей, руководителей...

Методические рекомендации по оценке действия и потенциальной опасности пестицидов для медоносных пчел iconМетодические рекомендации предназначены для организации самостоятельной...
Методические рекомендации составлены на основе учебной программы по дисциплине «Педагогические технологии», соответствующей государственному...

Методические рекомендации по оценке действия и потенциальной опасности пестицидов для медоносных пчел iconМетодические рекомендации по работе с одаренными детьми для дошкольных...
...

Методические рекомендации по оценке действия и потенциальной опасности пестицидов для медоносных пчел iconМетодические рекомендации и комплексы физических упражнений направленных...
Методические рекомендации к проведению дыхательной гимнастики Упражнения для укрепления органов дыхания

Методические рекомендации по оценке действия и потенциальной опасности пестицидов для медоносных пчел iconМетодические рекомендации для студентов медицинских факультетов Методические...
Министерство здравоохранения российской федерации рязанский медицинский университет

Методические рекомендации по оценке действия и потенциальной опасности пестицидов для медоносных пчел iconМетодические рекомендации по изучению дисциплины «Теплотехника» подготовлены...
Методические рекомендации предназначены для студентов, обучающихся по заочной и дистанционной форме обучения



Образовательный материал



При копировании материала укажите ссылку © 2013
контакты
lit-yaz.ru
главная страница